Ліофілізована плазма кроляча з EDTA

Представляємо Вашій увазі ліофілізована плазма кроляча з edta від відомого виробника в галузі біохімічні тести та реактиви - Biolife Italiana S.r.l., країна виробник - Італія. Артикул товару - 429936-3856.

Принцип методу і пояснення процедури

Тест на коагулазу був розроблений на основі спостережень на початку 1900-х років, коли певні стафілококи згортали плазму у гусака,1 людини, коня і вівці2.

Сьогодні широко використовуваним і загальноприйнятим методом диференціації стафілококів, пов'язаних з гострою інфекцією або харчовим отруєнням, є ідентифікація продукції позаклітинної коагулази з використанням тесту на коагулазу в пробірці.3,4 В залежності від їх здатності згортати плазму, стафілококи можна розділити на коагулазо-позитивні або коагулазо-негативні.

Фермент коагулазу впливає на "фактор, що реагує на коагулазу", присутній в плазмі кролика, виробляючи речовину, подібну тромбіну, яка активує фібриноген з утворенням фібрину, викликаючи згортання плазми. Коагулаза існує в двох формах: "зв'язана коагулаза" (або фактор злипання), яка пов'язана з клітинною стінкою, і "вільна коагулаза", яка вивільняється клітинною стінкою.

Зв'язана коагулаза виявляється за допомогою тесту на коагулазу на предметному склі, тоді як вільна, так і зв'язана коагулаза виявляються за допомогою тесту на коагулазу в пробірці.5 Для проведення пробірного тесту рекомендується використовувати Ліофілізовану плазму кролячу з EDTA в різних пропонованих форматах.

Як правило, плазму кролика інокулюють із зростанням з ізольованих колоній і досліджують на наявність гелю або згустку через 4 години і, якщо результат негативний, знову досліджують через 24 години.

На додаток до Staphylococcus aureus також інші види, включаючи Staphylococcus schleiferi і Staphylococcus intermedius, можуть давати позитивні результати в тесті на коагулазу в пробірці, але не є поширеними ізолятами від інфекцій людини.3,5

Для тесту на коагулазу в пробірці плазма з EDTA перевершує цитратну плазму, тому що організми, що використовують цитрат, такі як види Pseudomonas, Serratia marcescens, Enterococcus faecalis і штами Streptococcus, будуть згортати цитратну плазму.

Метод приготування

• REF 429936: відновіть вміст одного флакона з 15 мл стерильної дистильованої води в асептичних умовах.
• REF 429937: відновіть вміст одного флакона з 7.5 мл стерильної дистильованої води в асептичних умовах.
• REF 429938: відновіть вміст одного флакона з 3 мл стерильної дистильованої води в асептичних умовах.

Перемішуйте протягом 30 секунд за допомогою вихору до повного розчинення. Результати аналізу плазми кролика повинні бути розбавлені у пропорції 1:3.

Фізичні характеристики

• Вигляд ліофілізованої гранули щільна пастила
Вигляд коагулази плазми після відновлення жовтувато-рожевий опаловий розчин

Матеріали потрібні, але такі, що не надаються

Невеликі стерильні пробірки для культивування, водяна баня або інкубатор, стерильні петлі, стерильні дозатори, стерильна очищена вода, допоміжні поживні середовища і реагенти для ідентифікації колоній.

Зразки

У клінічній та неклінічній мікробіології зразки складаються з передбачуваних колоній стафілокока, вирощених на посівному середовищі. Тест на коагулазу з EDTA не може бути використаний для прямого тестування клінічних зразків.

Процедура тестування

З поверхні кожної обраної колонії видаляють інокулят стерильною петлею і переносять його в пробірку з Серцево-мозковим бульйон.

Інкубують бульйон при температурі 35-37 °C протягом 18-24 годин. Асептично додають 0,5 мл кожної культури до 0,5 мл Ліофілізованої плазми кролячої з EDTA в невеликих стерильних пробірках і інкубують при температурі 35-37 °C.

Зняття показників та інтерпретація

Спостерігайте кожні 60 хвилин протягом перших 4 годин інкубації за згортанням крові, обережно нахиляючи пробірку. Не струшуйте.

Якщо до 4 годин згусток крові не спостерігається, пробірку слід знову перевірити після 18-24 годин інкубації при 35-37 °C. Будь-яка ступінь згортання крові являє собою позитивний тест. Пластівчастий або волокнистий осад не є істинним згустком і повинен бути зареєстрований як негативний.

Контроль якості користувача

Всі вироблені партії продукту випускаються в продаж після проведення контролю якості на відповідність технічним вимогам.

Однак кінцевий користувач несе відповідальність за проведення випробувань з контролю якості відповідно до місцевих застосовних правил, відповідно до вимог акредитації та досвіду лабораторії. Тут нижче перераховані тест-штами, корисні для контролю якості.

• Позитивний контроль: S.aureus ATCC 25923
• Негативний контроль: S.epidermidis ATCC 12228

ATCC є торговою маркою Американської колекції типових культур

Експлуатаційні характеристики

Перед випуском у продаж репрезентативний зразок всіх партій Ліофілізованої плазми кролячої з EDTA тестується з позитивними і негативними штамами. Штами, позитивні до коагулази (показання після 2, 4, 24 годин інкубації при температурі 35-37 °C): S. aureus ATCC 25923, S. aureus ATCC 6538, S. aureus ATCC 33862, S. aureus MR ATCC 33592.

Штами, негативні до коагулази (показання після 24 годин інкубації при температурі 35-37 °C): S. epidermidis ATCC 12228, S. xylosus ATCC 35033, S. saprophyticus ATCC 15305, S. sciuri CB-BX 16.1, E. faecalis ATCC 19433 Всі протестовані штами дають реакцію коагулази відповідно до специфікацій.

Умови зберігання і термін придатності

Після отримання зберігайте продукт в оригінальній упаковці при температурі 2-8 °C далеко від прямих сонячних променів.

При правильному зберіганні продукт може бути використаний до закінчення терміну придатності. Не використовуйте продукт після цієї дати.

Відкриту і відновлену пробірку в асептичних умовах можна зберігати при температурі 2-8 ° C протягом 5 днів або розділити на 0,5 мл і зберігати при температурі -20 °C протягом 14 днів.

Перед використанням дайте температурі плазми вирівнятися до кімнатної температури. Не використовуйте плазму, якщо вона згорнулася при регідратації, якщо вона забруднена або якщо є інші ознаки погіршення (осад, нетиповий колір).

Обмеження методу

• Деякі види стафілококів, відмінні від S. aureus (S. intermedius, S. hycus, S. schleiferi subsp. coagulans, S. delphini, S. lutrae, S. pseudointermedius, S. argenteus), можуть дати позитивну реакцію на коагулазний тест.3-6
• Інокулят колонії, який використовується для тестування, повинен бути чистим, оскільки забруднювач може дати помилкові результати після тривалої інкубації.5
• Тест на коагулазу в пробірці не слід надмірно перемішувати, так як це може привести до стиснення згустку, що також дасть помилково негативні результати.5
• Слід дотримуватися обережності при використанні тесту на коагулазу в пробірці безпосередньо на бульйоні з передбачуваною позитивною коагулазою для культивування крові, в той час як недавні повідомлення показали відсутність втрати чутливості, коли тест на коагулазу в пробірці проводиться безпосередньо на нецентрифугованих бульйонах для посіву крові.7,8
• Спостереження за згортанням крові слід проводити протягом перших 4 годин, так як деякі стафілококи продукують фібринолізин, який може лізувати згустки на початку інкубаційного періоду.9,10 Однак, якщо згортання крові не спостерігається, пробірку слід інкубувати протягом ночі і знову спостерігати за затримкою згортання крові.
• Помилково негативні реакції коагулази можуть виникати, якщо тестований ізолят старше 18-24 годин або якщо спостерігається мізерне зростання.
• Тест на коагулазу на предметному склі має чутливість нижче, ніж тест в пробірці, оскільки він виявляє тільки зв'язаний фермент коагулази.
• Рекомендується провести біохімічне, імунологічне, молекулярне або мас-спектрометричне тестування для повної ідентифікації ізолятів. При необхідності проведіть тестування на чутливість до протимікробних препаратів.
• Цей реагент призначений в якості допоміжного засобу в діагностичних процедурах інфекційних захворювань; інтерпретація результатів повинна проводитися з урахуванням історії хвороби пацієнта, походження зразка і результатів інших діагностичних тестів.

Запобіжні заходи та попередження

• Цей продукт є якісною діагностикою in vitro, тільки для професійного використання; він повинен використовуватися належним чином навченим і кваліфікованим лабораторним персоналом з дотриманням затверджених запобіжних заходів щодо біологічної небезпеки і асептичних методів.
• Цей продукт не класифікується як небезпечний відповідно до чинного європейського законодавства
• Цей продукт містить сировину тваринного походження. Попередній і посмертний контроль тварин, а також контроль під час циклу виробництва і розподілу сировини не можуть повністю гарантувати, що цей продукт не містить будь-яких переданих патогенів. Тому рекомендується ставитися до продукту як до потенційно інфекційного і поводитися з ним з дотриманням звичайних спеціальних запобіжних заходів: не ковтати, не вдихати і не допускати контакту зі шкірою, очима, слизовими оболонками. Завантажте заяву TSE з веб-сайту www.biolifeitaliana.it, що описує заходи, прийняті компанією Biolife Italiana для зниження ризику, пов'язаного з інфекційними захворюваннями тварин.
• Всі лабораторні зразки слід вважати інфекційними.
• Лабораторна зона повинна контролюватися, щоб уникнути потрапляння забруднюючих речовин, таких як реагент, живильне середовище або мікробні агенти.
• Перед утилізацією стерилізуйте всі біологічно небезпечні відходи. Утилізуйте невикористаний реагент і пробірки, заражені штамами мікроорганізмів, відповідно до чинного місцевого законодавства.
• Не використовуйте цей продукт як активний інгредієнт для фармацевтичних препаратів або як виробничий матеріал, призначений для споживання людьми та тваринами.
• Сертифікати аналізу та Паспорт безпеки доступні на веб-сайті www.biolifeitaliana.it.
• Інформація, представлена в цьому документі, була визначена в міру наших знань і можливостей і являє собою керівництво по правильному використанню продукту, але без зобов'язань або відповідальності. У всіх випадках повинні дотримуватися існуючі місцеві закони, правила та стандартні процедури для дослідження зразків, зібраних з органічних зон для людей і тварин, для зразків навколишнього середовища і для продуктів, призначених для споживання людиною або тваринами. Наша інформація не звільняє наших клієнтів від відповідальності за перевірку придатності нашого продукту за призначенням.